Bromelain-Enzympulverist ein proteinhydrolysierendes Enzymsystem, das in hängenden Ananaspflanzen vorkommt. Es hat ein breites Anwendungsspektrum in der Lebensmittel- und Pharmaindustrie. Seine geringe Stabilität beeinträchtigt jedoch seine Anwendung, insbesondere in der Pharmaindustrie. In dieser Arbeit wurden die Auswirkungen von Feuchtigkeitsbedingungen, Temperaturbedingungen und „Coy-Strahlung“ auf Ananasprotease anhand des Ausgangsmaterials der pharmazeutischen Ananasprotease untersucht.
1 Materialien und Methoden
1.1 Bromelain-Rohstoffe
Bromelain-Enzympulver
1.2 Einfluss der Feuchtigkeitsumgebung
Das abgewogene und dosierte Enzym wurde offen in einen geschlossenen Exsikkator (Raumtemperatur) gestellt. Kieselgel, gesättigte NaQ-Lösung und gesättigte KNO-Lösung wurden in den Exsikkator gegeben. Die relative Luftfeuchtigkeit der Innenumgebung betrug 0,1 Prozent (75 ± 1) Prozent 2,92 Prozent und es wurden in regelmäßigen Abständen Proben entnommen, um die Enzymaktivität zu bestimmen.
1.3 Einfluss der Temperatur
Die abgewogenen und portionierten Enzyme wurden bei Temperaturen von 1–4 Grad, 29 Grad bzw. 55 Grad platziert und regelmäßig Proben zur Bestimmung der Enzymaktivität entnommen.
1.4 Strahlenbehandlung
Die abgewogenen und dosierten Enzyme wurden hermetisch in Zentrifugenröhrchen aus Kunststoff (PVC) verschlossen. Die Proben wurden bei Raumtemperatur (~20 Grad) mit „Coy-Strahlung“ bestrahlt. Die Dosisleistung betrug 198 kGy/h und die absorbierten Dosen betrugen 4 kGy8 kGy und 12 kGy. 3 Tage nach der Bestrahlung der Proben wurden die Enzymaktivität und die Gesamtkeimzahl bestimmt.
1.5 Bestimmungsmethode
Bromelain wurde mit der FIP-Methode bestimmt. Aus Kasein hydrolysiertes Tyrosin wurde mit einem UV-Spektrophotometer quantifiziert und die Enzymaktivität geschätzt. Als Substrat wurde Kasein verwendet und durch Ananasprotease hydrolysiert.
Die Gesamtzahl der Bakterien wurde mithilfe der Plattenkoloniezählmethode bestimmt.
2 Ergebnisse
2.1 Einfluss der Feuchtigkeitsbedingungen auf die Lagerung von Bromelain-Enzympulver
Die Ergebnisse der Auswirkung der Feuchtigkeitsbedingungen auf die Lagerung von Bromelain sind in Tabelle 1 aufgeführt. Wie in Tabelle 1 zu sehen ist, war die Bromelain-Enzymaktivität in der trockenen Umgebung relativ stabil. Die Geschwindigkeit der Enzyminaktivierung wurde mit zunehmender Umgebungsfeuchtigkeit beschleunigt. Im späten Stadium des Experiments nahm die Enzymaktivität unter Bedingungen hoher Luftfeuchtigkeit deutlich ab. Nur 40,4 Prozent bzw. 14,4 Prozent der Enzymaktivität blieben nach 105 Tagen bzw. 315 Tagen Lagerung von Bromelain übrig. Dagegen betrug die Erhaltung der Enzymaktivität 80,3 Prozent und bei relativer Luftfeuchtigkeit (75 plus 1) 80,0 Prozent.
Aus der beigefügten Abbildung ist ersichtlich, dass bei trockener oder niedriger Luftfeuchtigkeit. Die Inaktivierung der Ananasprotease erfolgte im frühen bis späten Stadium der Konservierung und flachte ab. Dies liegt daran, dass die Luftfeuchtigkeit des Enzyms in der frühen Phase der Konservierung höher ist als die Umgebungsfeuchtigkeit. Die höhere Feuchtigkeit verleiht der Enzymstruktur eine gewisse Flexibilität. Die Konformation des aktiven Zentrums des Enzyms kann sich ändern. Wenn das Enzym das Niveau der trockenen Umgebung erreicht, nimmt die Feuchtigkeit des Enzyms ab und die Enzymaktivität stabilisiert sich tendenziell. Aus der Abbildung ist auch ersichtlich, dass die Enzymaktivität in einer Umgebung mit hoher Feuchtigkeit abgenommen hat. Der Grund dafür liegt in der Selbsthydrolyse der Protease, zusätzlich zu der hohen Feuchtigkeit, die die Flexibilität der Enzymstruktur erhöht.
2.2 Der Einfluss der Temperaturbedingungen auf die Lagerung von pflanzlichem Bromelain-Enzympulver
Tabelle 2 zeigt die Ergebnisse der Untersuchung darüber, wie sich die Temperatur auf die Lagerung von Ananasproteasen auswirkt. Ananasproteasen wurden sowohl bei hohen als auch bei niedrigen Temperaturen inaktiviert, wie in Tabelle 2 gezeigt, wobei hohe Temperaturen weniger stabil waren. Ihre Inaktivierungsrate war in der frühen Phase der Lagerung schneller und in der späteren Phase moderater. Die Erhaltungsrate des Enzyms nach 285 Tagen bei 51 Grad (68,0 Prozent) war höher als nach 105 Tagen bei hoher Luftfeuchtigkeit (40,4 Prozent). In diesem Fall war der Einfluss der Temperatur auf das Enzym viel geringer als der der Luftfeuchtigkeit. Der Einfluss der Temperatur auf das Enzym war viel geringer als der der Luftfeuchtigkeit.
2.3 Wirkung von 60Cor-Strahlung auf die Ananas-Proteaseaktivität und bakterizide Wirkung
Die Ergebnisse der Wirkung von 60Cor-Strahlung auf die Ananas-Proteaseaktivität und die sterilisierende Wirkung sind in Tabelle 3 dargestellt. Wie in Tabelle 3 zu sehen ist, betrug der Verlust der Enzymaktivität 10,6 Prozent, 11,0 Prozent und 15,5 Prozent, wenn die Die absorbierte Dosis betrug 4 kGy, 8 kGy bzw. 12 kGy. Ihre Sterilisationseffekte waren mit 99,9 Prozent, 100 Prozent bzw. 100 Prozent vergleichbar. Um den Verlust der Enzymaktivität zu minimieren, kann je nach Verschleppung der Enzymquelle eine Dosis von 4 kGy oder 8 kGy gewählt werden. Da die Menge an Fungizid sowohl die Sterilisation als auch den Verlust der Enzymaktivität verringert
3 Diskussion
In diesem Experiment war die Empfindlichkeit des Enzyms gegenüber Feuchtigkeit höher als gegenüber Temperatur. Die Enzymüberlebensrate unter einer Kieselgel-Trocknungsumgebung war besser als unter niedriger Temperatur, und die Enzyminaktivierungsrate unter einer Umgebung mit hoher Luftfeuchtigkeit war deutlich höher als unter 55 Grad. Die Umgebung mit hoher Luftfeuchtigkeit erhöhte den Feuchtigkeitsgehalt des Enzyms und wurde zum Hauptfaktor der Enzyminaktivierung. Dies hängt eng mit der Selbsthydrolyse der Ananasprotease zusammen. Daher sollten wir bei der Herstellung besonders auf die Luftfeuchtigkeit der Umgebung, in der das Enzym gelagert wird, und die Trockenheit des Enzyms selbst achten. Darüber hinaus kommt es zu einer Enzyminaktivierung, wenn „Coy-Strahlung zur Sterilisation von Ananasprotease verwendet wird. Wie kann die Stabilität der Konservierung und Sterilisation von Bromelain weiter verbessert werden? Der beste Weg, um die Stabilität der Konservierung und Sterilisation von Bromelain-Enzympulver zu verbessern. Zusätze werden eines der Mittel sein.
Guanjie liefert Bromelain-Enzympulver in großen Mengen unter Verwendung der GDU-Testmethode. Unser Produktionsprozess läuft in CGMP-Standardwerkstätten ab und nutzt drei Produktionslinien in zwei Fabriken und zwei unabhängige Labore. Bei Fragen zu unseren Produkten kontaktieren Sie uns bitte unterinfo@gybiotech.com.
